高壓滅菌鍋的使用注意事項(xiàng)

        高壓蒸汽滅菌原理
        高壓蒸汽滅菌應(yīng)用廣泛，效率高，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中zui常用的滅菌方法。這種殺菌方法是基于水的沸點(diǎn)隨著蒸汽壓力的增加而增加的原理而設(shè)計(jì)的。當(dāng)蒸汽壓力達(dá)到1.05千克/cm2時(shí)，水蒸氣溫度上升到121 ℃。15 ~ 30分鐘后，可以殺死罐內(nèi)物品上的各種微生物及其孢子或孢子。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿、傳染性標(biāo)本和工作服都可以用這種方法進(jìn)行消毒。
        請(qǐng)注意高壓蒸汽滅菌的原理: 它是根據(jù)水的沸點(diǎn)隨著蒸汽壓力的增加而增加的原理設(shè)計(jì)的。
        壓力: 100KPa，水蒸氣溫度: 115 ℃，時(shí)間: 20min，各種微生物及其孢子
        壓力: 147KPa，水蒸氣溫度: 121 ℃，時(shí)間: 15-30min，各種微生物及其孢子或孢子
        壓力: 156KPa，水蒸氣溫度: 180 ℃，時(shí)間: 4H，熱低 (熱原): 熱低，即細(xì)菌中的脂多糖
        壓力: 156KPa，水蒸氣溫度: 250 ℃，時(shí)間: 45 '，熱低 (熱原): 熱低，即細(xì)菌中的脂多糖
        壓力: 156KPa，水蒸氣溫度: 650 ℃，時(shí)間: 1 '，熱低 (熱原): 熱低，即細(xì)菌中的脂多糖
        溫度越高，所需時(shí)間越短，熱穿透能力越強(qiáng)。一般認(rèn)為115 ℃-121.3 ℃ 不破壞培養(yǎng)基的組成。
        高壓蒸汽鍋滅菌詳情
        高壓蒸汽滅菌是將要滅菌的物品放置在密封的加壓滅菌鍋中，并通過(guò)加熱產(chǎn)生蒸汽，將消毒鍋套件中的水煮沸。當(dāng)蒸汽急速將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中排出時(shí)，關(guān)閉排氣閥并繼續(xù)加熱。此時(shí)，由于蒸汽不能溢出，消毒鍋內(nèi)的壓力增加，從而增加沸點(diǎn)，獲得高于100 ℃ 的溫度。它導(dǎo)致細(xì)菌蛋白的凝固和變性，以達(dá)到殺菌的目的。當(dāng)使用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌時(shí)，排除滅菌鍋中的冷空氣是極其重要的，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬毫Υ笥谒魵獾呐蛎泬毫?，所以?dāng)水蒸氣含有空氣時(shí)，在相同的壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽。因此，飽和蒸汽的滅菌更加*!1.使用前應(yīng)在水位線處加入高壓消毒鍋水;
        2.將培養(yǎng)基、蒸餾水或其他待消毒器具放入消毒鍋中，蓋上鍋蓋，并檢查排氣閥和安全閥的狀態(tài) (打開(kāi)上下排氣閥并關(guān)閉安全閥，然后加熱以方便空氣排出，上部，下排氣閥同時(shí)處于打開(kāi)狀態(tài)。當(dāng)水蒸氣從上下閥溢出時(shí)，在這種狀態(tài)保持7或8分鐘后，即在空氣排出后，關(guān)閉上排氣閥并調(diào)節(jié)下排氣閥。安全閥保持關(guān)閉)，
        3.打開(kāi)電源，檢查參數(shù)設(shè)置是否正確，然后按下 “工作" 按鈕開(kāi)始滅菌鍋工作; 當(dāng)溫度達(dá)到105 ℃ 時(shí)，自動(dòng)發(fā)送冷空氣，底部排水龍頭將自動(dòng)關(guān)閉，然后壓力開(kāi)始上升;
        4.當(dāng)壓力上升到0.15MPa(121 ℃) 時(shí)，滅菌鍋會(huì)自動(dòng)再次放氣，然后在記錄時(shí)，一般培養(yǎng)基消毒20分鐘，蒸餾水消毒30分鐘;
        V.達(dá)到規(guī)定的滅菌時(shí)間后，關(guān)閉電源，打開(kāi)放氣閥緩慢放氣; 當(dāng)壓力指針降至0.00MPa時(shí)，只有當(dāng)沒(méi)有除汽放氣閥時(shí)才能打開(kāi)蓋子。
        六.注意事項(xiàng)
        1.蒸汽耗盡前不要打開(kāi)壓力鍋;
        2.如果消毒介質(zhì)沒(méi)有及時(shí)在鍋內(nèi)取出，蒸汽排出后應(yīng)打開(kāi)蓋子，介質(zhì)不應(yīng)在鍋內(nèi)過(guò)夜。
        3.當(dāng)量規(guī)手高于0.05MPa時(shí)，蒸汽釋放得太快，以防止壓力快速下降以及液體從培養(yǎng)容器中沸騰和溢出。
        4.在操作過(guò)程中，請(qǐng)注意安全并小心燃燒。
        在標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下，水的沸點(diǎn)為100攝氏度。壓力越高，相應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)越高。這是高壓蒸鍋，它表明壓力必須大于標(biāo)準(zhǔn)大氣壓 (通常地球表面的大氣壓被認(rèn)為是標(biāo)準(zhǔn)大氣壓)，也就是說(shuō)，高壓蒸鍋必須超過(guò)100攝氏度才能沸騰并產(chǎn)生蒸汽。在關(guān)閉安全閥之前，至少要等到水煮沸并排出蒸汽約一分鐘，這可以使高壓蒸鍋中的壓力迅速上升，事實(shí)證明，由于壓力的迅速上升，沸水停止沸騰。當(dāng)壓力高、沸點(diǎn)高時(shí)，水蒸氣變成液態(tài)水，釋放出大量汽化潛熱，這是高溫高壓的目的，從而在相同溫度下達(dá)到殺菌原理的目的，濕熱的殺菌效果大于干熱。有三個(gè)原因:
        首先，天氣又熱又潮濕細(xì)菌吸水，蛋白質(zhì)容易凝固。由于蛋白質(zhì)含水量的增加，所需的凝固溫度降低，
        第二，濕熱的滲透大于干熱;
        第三，濕熱蒸汽有潛熱。當(dāng)每克水在100 ℃ 時(shí)，當(dāng)它從氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)，可以釋放出2.26kJ (千焦耳) 的熱量。這種潛熱可以迅速提高滅菌對(duì)象的溫度，從而提高滅菌效率。
        當(dāng)使用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌時(shí)，排除滅菌鍋中的冷空氣是極其重要的，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬毫Υ笥谒魵獾呐蛎泬毫?，所以?dāng)水蒸氣含有空氣時(shí)，在相同的壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽。如果壓力沒(méi)有下降到0，打開(kāi)排氣閥，鍋內(nèi)的壓力會(huì)突然下降，由于內(nèi)外壓力不平衡，導(dǎo)致容器中的培養(yǎng)基沖出燒瓶口或試管口，造成棉花覆蓋污染的培養(yǎng)基和污染。它需要超過(guò)100度，即相應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)，才能使水劇烈沸騰并消除鍋中更多的空氣。
        高溫滅菌操作中常見(jiàn)錯(cuò)誤分析
        高溫殺菌是指用熱能殺死微生物。原理是高溫使原生質(zhì)體內(nèi)的蛋白質(zhì)變性，使酶失活，導(dǎo)致微生物死亡。高溫滅菌主要包括高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌和燃燒滅菌。如果操作不當(dāng)，則無(wú)法達(dá)到預(yù)期的殺菌效果。常見(jiàn)錯(cuò)誤分析如下。
        1高壓蒸汽滅菌
        蒸汽滅菌屬于濕熱滅菌。由于濕熱滅菌的潛在存在，滅菌物體的溫度低于蒸汽。蒸汽在其表面凝結(jié)成水以釋放潛力，消毒物體的溫度可以迅速升高。并且由于水和蒸汽比空氣具有更大的熱容量、更快的熱傳導(dǎo)和更強(qiáng)的滲透，與干熱滅菌相比，滅菌需要更低的溫度和更短的時(shí)間。由于高壓蒸汽滅菌中的蒸汽溫度隨著壓力的增加而升高，因此用于滅菌的高溫蒸汽是通過(guò)壓力獲得的。
        便攜式高壓滅菌鍋操作中常見(jiàn)的錯(cuò)誤包括:
        (1) 排氣不完整。在增強(qiáng)之前，應(yīng)將鍋內(nèi)的冷空氣排干。由于空氣是不良的導(dǎo)熱體，如果不排干，冷空氣將很好地聚集并停留在消毒罐中消毒缸的中下部，圍繞待消毒的物體。在這種情況下，如果鍋內(nèi)只排除一半的空氣，當(dāng)量規(guī)手達(dá)到105帕?xí)r，鍋內(nèi)的實(shí)際溫度只能達(dá)到112 ℃，比要求的121 ℃ 低9 ℃。很多，會(huì)導(dǎo)致滅菌不*，可能會(huì)引起大面積的細(xì)菌。(自動(dòng)高壓消毒鍋上下排氣閥必須打開(kāi)并加熱以排出空氣)
        (2) 排氣軟管未按要求插入滅菌缸的下部，或排氣軟管損壞或丟失。消毒鍋中的冷空氣通過(guò)排氣軟管排出。上述情況將導(dǎo)致滅菌缸外的蒸汽通過(guò)排氣閥直接排出鍋內(nèi)，滅菌罐內(nèi)的空氣排放將被堵塞。
        (3) 消毒缸內(nèi)的物品堆積過(guò)緊過(guò)滿(mǎn)，阻礙了蒸汽的循環(huán)和熱交換，減慢了容器內(nèi)的溫升，導(dǎo)致物體內(nèi)部滅菌不*。
        (4) 加熱太快。滅菌時(shí)間是根據(jù)達(dá)到要求溫度后的持續(xù)時(shí)間來(lái)計(jì)算的，但溫度的上升和下降過(guò)程也起到滅菌的作用。如果溫度上升和下降太快，滅菌效果將受到影響總累積溫度的影響。此外，如果溫度上升太快，特別是當(dāng)使用外源蒸汽時(shí)，滅菌物體內(nèi)部的溫度將落后于壓力表指示的溫度。
        (5) 消毒對(duì)象的體積 (容量) 太大。在組織培養(yǎng)或常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，高溫蒸汽滅菌通常在121 ℃ 下需要15分鐘 (即蒸汽壓力為1千克/cm2或15鎊/英寸2，或0.105MPa)。本規(guī)定僅適用于容量小于200毫升的試管和三角瓶。如果體積過(guò)大，特別是固體介質(zhì)，會(huì)導(dǎo)致滅菌不*，滅菌時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)。
        (6) 滅菌時(shí)間的任何延長(zhǎng)。規(guī)定的滅菌溫度和時(shí)間是通過(guò)科學(xué)實(shí)驗(yàn)確定的，只要能按照正確的滅菌程序達(dá)到滅菌目的。然而，在實(shí)踐中，人們往往為了 “確保*滅菌" 而任意延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。這樣，在滅菌過(guò)程中溫度對(duì)培養(yǎng)基的損害影響被忽略，這是不值得損失的。
        (7) 溫度不穩(wěn)定。滅菌過(guò)程中，溫度 (壓力) 升降，尤其是便攜式電能滅菌鍋。它沒(méi)有溫度控制裝置，很難控制溫度。操作員可以配置調(diào)壓變壓器，通過(guò)調(diào)節(jié)電壓來(lái)控制溫度。此外，還經(jīng)常存在消毒鍋內(nèi)加水太少 (應(yīng)添加2 ~ 3L); 容器內(nèi)溶液過(guò)多 (少于2/3) 等問(wèn)題; 安全閥等故障。
        2干熱滅菌
        干熱滅菌是指在烘箱中160 ℃ 下保持2小時(shí)消除物體上的微生物的方法。常見(jiàn)錯(cuò)誤包括:
        (1) 將消毒物品 (如培養(yǎng)皿) 堆放，堆放得太滿(mǎn)太擁擠，妨礙空氣流通以及熱傳遞和交換;
        (2) 加熱時(shí)不要打開(kāi)盒子的頂部，影響盒子中冷空氣和水蒸氣的去除;
        (3) 在高溫 (80 ℃ 以上) 下拆箱取物，熱蒸汽噴出導(dǎo)致燒傷和突然冷卻，導(dǎo)致玻璃器皿破裂;
        (4) 溫度過(guò)高 (180 ℃ 以上) 導(dǎo)致包裝紙和棉布結(jié)焦，失去防菌或過(guò)濾功能;
        (5) 將槍頭、離心管、試管蓋、過(guò)濾器等不耐熱的塑料制品放入烘箱中滅菌熔化。
        3燃燒滅菌
        也就是說(shuō)，直接用火焰將微生物燒死。特點(diǎn): 簡(jiǎn)單、快速、*。它主要用于接種工具和器具的消毒。例如，接種杯、鑷子、剪刀、玻璃棒、瓶口和密封用鋁箔滅菌的常見(jiàn)錯(cuò)誤如下:
        (1) 接種工具的滅菌范圍不夠。如果長(zhǎng)度不夠，則由于燃燒過(guò)程中沒(méi)有旋轉(zhuǎn)，內(nèi)外兩側(cè)的滅菌不均勻;
        (2) 接種工具用于接種而不降至常溫;
        (3) 玻璃器皿過(guò)度燃燒，使棉布覆蓋、密封薄膜結(jié)焦或熔化